重组蛋白原核表达服务

卡梅德生物

细胞转染方法及脂质体介导法

细胞转染是指将外源核酸物质(DNA或者RNA)输送至真核细胞内部的技术,以进行多种细胞生理和生化的研究,包括:…

大肠杆菌内表达的蛋白质N端的甲硫氨酸为什么会被切除?

以下内容来自BioEngX-生物催化剂微信群 A:请教一下各位大神,为什么这个P450在大肠杆菌表达,N端的M…

干货 | 实验篇之荧光定量 PCR(下)

前面给大家着重介绍了 qPCR 的实验流程和注意事项【干货 | 实验篇之荧光定量 PCR(上)】想必大家意犹未…

虚位以待

干货 | 实验篇之荧光定量 PCR(上)

哈喽啊~小编又来了…了…了…作为一名认真的科研狗,今天要继续给大家分享科研…

酶切位点,保护碱基,kozak序列,这些引物设计要素你掌握了么

首先,限制性酶切位点就不用多说了吧,它就是DNA分子上被特异性的核苷酸序列(4-8bp),能被限制性内切酶识别…

干货 | 实验篇之RT-PCR

作者:高天政 逆转录实验作为是常见的分子生物学实验之一,虽然看上去步骤简单,但当你实际操作时就会发现各种问题扑…

RNA反转录的六大要素

老话说的好,万事开头难。而这话在RT-PCR中则体现的淋漓尽致,其开头的第一步——将RNA反转为cDNA,表面…

视频|细胞转染介绍

前言 转染是将遗传物质如DNA和双链RNA导入到哺乳动物细胞内的过程。将DNA导入细胞使得它可利用细胞自身的细…

视频|DNA连接反应

前言 分子生物学中,连接是指通过形成磷酸二酯键将两个DNA片段连起来。连接反应是由一种叫连接酶的酶催化进行的。…

视频|限制性内切酶消化

前言 限制性酶或内切酶会识别并切开DNA上的某个特定序列。这些酶在细菌中天然存在,用来抵御感染细菌的病毒-噬菌…

克隆基因全长读码框的秘诀

在分子克隆实验中,获取基因的全长开放读码框(ORF)有时候会是一个挑战。对于新手来说,这个实验有时候可以卡很久…

实验 | RNA提取实验中的那些玄学

当年还是新手的时候,曾经在网上读过不少关于提取RNA心得体会的文章。如今从事科研已经十年有余,现在回过头再去读…

视频|质粒纯化

质粒纯化是将质粒DNA与基因组DNA、蛋白质、核糖体以及细菌细胞壁分离开的一种技术。质粒是小的环状双链DNA,…

视频|热激法转化细菌

热激法转化细菌的介绍 细菌转化是一种应用广泛的方法,它将外源DNA导入细菌,用以扩增或者克隆DNA。能够摄入外…

电转化的一些技巧与经验

原文链接:https://international.neb.com/tools-and-resources/…

视频|电穿孔转化

“转化”这一术语是指细胞摄入外源DNA。自然界中,某些类型的细菌可以发生转化。而在分子生物学中,可…

视频|PCR的原理与操作

聚合酶链式反应,或称PCR,是一种通过热循环反应来扩增DNA的技术,热循环是指在固定的时间间隔内温度变化的循环…

视频|分子克隆操作详解

分子克隆是将重组DNA插入到载体中的一套方法,载体作为DNA分子的携带者,将在宿主体内复制重组DNA片段。而D…

【简述】相对定量法分析qRT-PCR数据

qRT-PCR想必很多人都不陌生。小C之前做了长达一年的相对定量,也还是迷迷糊糊的。但是做实验怎么可以迷迷糊糊…

常用引物设计工具大集合

经常在实验室跑PCR的同学看过来了,今天我们汇总一下那些设计引物的软件或者网站,如果你们还有其他好用的工具,欢…

如何让你的克隆天衣无缝

NA克隆带来的那场分子生物学革命已经过去了四十多年。在这段时间里,DNA的克隆工具并没有发生多大的变化,对于许…

不谈原理谈技术:qRT-PCR怎样才能做到“三线合一”

实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是分子实验室家喻户晓的基因表达定量技术。无论是刚入实验室的菜鸟,还是久经沙…

一文教你如何从细胞中提取高质量RNA

在实验室中,尤其是分子生物类的实验室中不可避免的会遇到细胞总RNA提取实验,所提RNA样品的质量和纯度直接影响…

一文了解质粒的常用组成元件

1952年,美国的生物科学家Joshua Lederberg第一次引进了质粒(plamid)这一术语,用来表示…

如何使用Primer5进行引物设计

质粒构建第一步就是设计引物。首先大体了解一下引物设计的一些通用原则: 1. 引物长度一般在15~30 bp,最…

DNA电泳常见问题与对策

DNA电泳(electrophoresis)可能是从事分子生物学研究的小伙伴们进入实验室后做的第一个实验,其重…

DNA连接反应中不可忽略的技巧

在前面的文章中,小编给大家了讲了如何让酶切“时半功倍”的技巧。既然提到了酶切反应 (digestion rea…

Flp-In™蛋白表达技术简介

今天向大家介绍一种在哺乳动物细胞蛋白表达领域被广泛应用的表达技术-Flp-In™系统。传统的哺乳动物细胞基因重…

选择正确的大肠杆菌细胞

在我们有了质粒、了解了细胞转化的方法之后,就应该开始考虑选择哪种感受态细胞进行转化。市面上的感受态细胞种类相当…

那些年,在实验室用过的抗生素

使用抗生素是分子生物学实验常用方法,有许多筛选实验都需要用到抗生素。多数情况下,这里提到的抗生素是用来筛选细菌…

表达蛋白,你用什么系统?

当你决定克隆或者表达某个蛋白质时,你需要考虑使用哪些表达系统。 目前有以下一些可以适用于大规模生产蛋白的表达系…

如何自己制备大肠杆菌感受态细胞

前几期文章中,我们了解到了大肠杆菌转化方法(戳这里)和常见大肠菌感受态细胞的用途(戳这里)。本期为大肠杆菌转化…

大肠杆菌感受态细胞的种类与选择

上周一的文章中,我们聊到了两种不同的大肠杆菌转化的方法,化学转化和电穿孔转化(详情点这里 )。在我们知道细胞转…

细菌转化简说

将外源质粒导入大肠杆菌的操作被称之为转化。除了最传统的化学转化(Chemical Transformation…

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